Измерение спектрофотометром — это распространённый метод количественного и качественного анализа веществ на основе их способности поглощать свет при определённых длинах волн. Этот метод широко используется в химии, биологии, медицине, фармацевтике и экологии благодаря своей высокой точности, скорости и простоте выполнения.
Принцип спектрофотометрического измерения основан на законе Бугера–Ламберта–Бера. Он гласит, что интенсивность света, проходящего через вещество, уменьшается пропорционально его концентрации и длине оптического пути. Иными словами, чем больше молекул вещества находится в пути светового луча, тем больше света они поглощают. Это позволяет определить концентрацию вещества, зная интенсивность падающего и прошедшего через образец света.
Основные этапы измерения спектрофотометром включают:
Подготовку прибора. Выбирается нужная длина волны, соответствующая максимальному поглощению исследуемого вещества. Прибор должен быть откалиброван и прогрет, особенно если используется УФ-источник.
Подготовку образца. Раствор исследуемого вещества наливается в кювету, тщательно очищенную от загрязнений. При необходимости используется фильтрация или разведение раствора до требуемой концентрации.
Установка контрольного образца (бланка). Обычно в качестве бланка используют чистый растворитель, не содержащий исследуемое вещество. Он позволяет откалибровать прибор и устранить влияние среды.
Измерение оптической плотности (абсорбции). После калибровки производится измерение раствора с веществом. Результат отображается в виде оптической плотности (А) или процента пропускания (%Т).
Расчёт концентрации. При наличии калибровочной кривой или с использованием формулы закона Бера можно точно определить концентрацию исследуемого вещества в растворе.
Значение спектрофотометрического измерения трудно переоценить. В клинической диагностике оно помогает выявлять уровень глюкозы, холестерина, билирубина и других важных показателей в крови. В фармацевтике используется для контроля качества и точного дозирования препаратов. В экологии позволяет быстро выявлять загрязнения в воде и воздухе.
Таким образом, измерение спектрофотометром представляет собой универсальный, точный и эффективный метод анализа, который стал неотъемлемой частью современной лабораторной практики.
